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文 件 編 號(hào)        XX-XX				無(wú)菌室的使用與管理制度				第B版
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無(wú)菌室的使用與管理制度
                                        XX-XX
一、無(wú)菌室的使用
1、無(wú)菌室應(yīng)保持清潔整齊，室內(nèi)僅存放必須的檢驗(yàn)用具如酒精燈、酒精棉、打火機(jī)、鑷子、接種針、接種環(huán)、玻璃鉛筆等。不要放與檢
測(cè)無(wú)關(guān)的物品。
2、 室內(nèi)檢驗(yàn)用具及凳桌等保持固定位置，不隨便移動(dòng)。
3、每周用84消毒液水溶液擦拭工作臺(tái)、門、窗、桌、椅及地面，然后用有效氯濃度1000mg/L的溶液噴霧消毒空氣，**后紫外燈殺菌#p#分頁(yè)標(biāo)題#e#
半小時(shí)。
4、定期檢查室內(nèi)空氣無(wú)菌狀況，細(xì)菌數(shù)應(yīng)控制在10個(gè)以下，發(fā)現(xiàn)不符合要求時(shí)，應(yīng)立即徹底消毒滅菌。/無(wú)菌室無(wú)菌程度的測(cè)定方法：取普通肉湯瓊脂平板、改良馬丁培養(yǎng)基平板各3個(gè)（平板直徑均9厘米），置無(wú)菌室各工作位置上，開蓋曝露半小時(shí)，然后倒置進(jìn)行培養(yǎng)，測(cè)細(xì)菌總數(shù)應(yīng)置37℃溫箱培養(yǎng)48小時(shí)；測(cè)霉菌數(shù)則應(yīng)置27℃
溫箱培養(yǎng)5天。細(xì)菌`霉菌總數(shù)均不得超過10個(gè)為。
5、無(wú)菌室殺菌前，應(yīng)將所有物品置于操作之部位（待檢物例外），
然后打開紫外燈殺菌30分鐘，時(shí)間一到，關(guān)閉紫外燈待用。
6、進(jìn)入無(wú)菌室前，必須于緩沖間更換消毒過的工作服、工作帽及工
作鞋。
7、 操作應(yīng)嚴(yán)格按照無(wú)菌操作規(guī)定進(jìn)行，操作中少說話，不喧嘩，
以保持環(huán)境的無(wú)菌狀態(tài)。
8、 高壓蒸汽滅菌:工作服、口罩、稀釋液等，置高壓殺菌鍋內(nèi)，一般采用121℃滅菌半小時(shí),當(dāng)然不同的培養(yǎng)基有不同的要求,應(yīng)分別處理。
9、火焰滅菌： 接種針、接種環(huán)等可直接火焰滅菌。
10、高溫干燥滅菌： 各種玻璃器皿、注射器、吸管等，置于燥箱中160℃滅菌2小時(shí)。
11、一 般消毒:無(wú)菌室內(nèi)的凳、工作臺(tái)、試管架、天平、待檢物容器或包裝均無(wú)法進(jìn)行滅菌，必須用其他方法進(jìn)行消毒處理，采用84消毒液擦拭消毒，工作人員的手也用此法進(jìn)行消毒。
12、 空氣的消毒： 開啟紫外燈照射30―60分鐘 即可。
二、無(wú)菌室的準(zhǔn)備工作使用方法
1、 先進(jìn)行無(wú)菌室空間的消毒，開啟紫外燈30―60分鐘。
2、 檢驗(yàn)用的有關(guān)器材， 搬入無(wú)菌室前必須分別進(jìn)行滅菌消毒。
3、 操作人員必須將手清洗消毒，穿戴好無(wú)菌工作衣、帽和鞋，才能進(jìn)入無(wú)菌室。
4、 進(jìn)入無(wú)菌室后再一次消毒手部，然后才進(jìn)行檢驗(yàn)操作。
三、無(wú)菌室操作過程注意事項(xiàng)
1、 動(dòng)作要輕，不能太快，以免攪動(dòng)空氣增加污染；玻璃器皿也應(yīng)輕取輕放，以免破損污染環(huán)境。
2、 操作應(yīng)在近火焰區(qū)進(jìn)行。
3、 接種環(huán)、接種針等金屬器材使用前后均需灼燒，灼燒時(shí)先通過內(nèi)焰，使殘物烘干后再灼燒滅菌。
4、 使用吸管時(shí)，切勿用嘴直接吸、吹吸管，而必須用洗耳球操作
5、 觀察平板時(shí)不好開蓋，如欲沾取菌落檢查時(shí)，必需靠近火焰區(qū)操作，平皿蓋也不能 大開，而是上下蓋適當(dāng)開縫。
6、進(jìn)行可疑致病菌涂片染色時(shí)，應(yīng)使用夾子夾持玻片，切勿用手直接拿玻片，以免造成污染，用過的玻片也應(yīng)置于消毒液中浸泡消毒，然后再洗滌。
7、 工作結(jié)束，收拾好工作臺(tái)上的樣品及器材，**后用消毒液擦拭工作臺(tái)。
四、無(wú)菌室管理規(guī)定
1、無(wú)菌室地面、臺(tái)面、其它表面每日晨擦拭1次。超凈臺(tái)每日晨75%酒精擦拭超凈臺(tái)消毒，每次使用前準(zhǔn)備好物品，將超凈臺(tái)紫外滅菌30分鐘后方可使用。
2、  從室外帶入無(wú)菌室內(nèi)的所有物品表面要用75%酒精或紫外照射預(yù)先消毒。無(wú)菌操作前75%酒精消毒手掌、手背。整個(gè)操作嚴(yán)格執(zhí)
行無(wú)菌操作。
3、每次使用后，臺(tái)內(nèi)物品全部取出并用消毒液噴灑消毒用后的物品歸位，垃圾帶出無(wú)菌室。連續(xù)使用時(shí)間超過1小時(shí)，請(qǐng)預(yù)約登記。
4、 無(wú)菌室內(nèi)定期消毒滅菌：噴灑有效氯濃度1000mg/L的溶液        擦洗桌面、凳子，無(wú)菌室內(nèi)噴霧消毒后，紫外滅菌30分。每周一次。
5、無(wú)菌室內(nèi)無(wú)菌狀況定期檢測(cè)：滅菌后的接種室內(nèi)桌上和桌下各放一套培養(yǎng)基平皿，暴露15分鐘，蓋上，37℃培養(yǎng)24小時(shí)，每個(gè)平皿的菌落≤4，則認(rèn)為效果良好，否則需延長(zhǎng)照射時(shí)間或加強(qiáng)其它措
施。每周一次。
6、滅菌后物品放在指定位置，注明滅菌日期，高壓滅菌物品可存放
7-14天，過期不能再用，需重新包裝滅菌。
7、 所有準(zhǔn)備進(jìn)入無(wú)菌室工作的人員必需shou先了解細(xì)胞培養(yǎng)的基本要
求和操作規(guī)范，并進(jìn)行必要的培訓(xùn)。